Pemrosesan tisu adalah landasan utama histologi, mengubah sampel biologi segar menjadi spesimen yang stabil, tertanam parafin siap untuk pemeriksaan mikroskopis. Urutan yang kompleks-fiksasi, dehidrasi, pembersihan, paviliun, dan embedding-memberdayakan peneliti, ahli jalur, dan ahli kesehatan untuk belajar struktur seluler dan molekul, memajukan penelitian dan diagnostik medis. Namun, ada kesalahan pada tahap apa pun dapat mengurangi hasil, yang menghasilkan tisu terdistorsi, bagian yang buruk, atau potensi diagnostik yang hilang. Dalam panduan komprehensif ini, kami menjelajahi masalah umum dalam pemrosesan tisu, penyebab, dan praktis untuk memastikan hasil berkualitas. Baik Anda adalah seorang teknisi lab, peneliti Kudus, atau bidang kesehatan, menguasai tantangan ini sangat penting bagi kesuksesan Anda.
Ketepatan sangat penting dalam pemrosesan histologi jaringan, namun masalah yang sering terjadi karena kesalahan manusia, teknik yang tidak tepat, atau keterbatasan peralatan. Di bawah ini, kami memeriksa tiga tantangan umum-penyusutan tisu, mempertahankan udara dalam sampel, dan embedding yang buruk atau penyusutan solusi mereka yang menyebabkan dan menyebabkan aliran kerja Anda.
Penyusutan tisu adalah rintangan umum dalam histologi, sering mendistorsi struktur seluler dan menghambat analisis mikroskopik akurat. Penelitian menunjukkan tisu dapat menyusut sebesar 20% atau lebih dengan waktu mereka tertanam dalam parafin, memengaruhi morfin dan keandalan diagnostik. Masalah ini muncul ketika perbaikan seperti formalin gagal menembus sepenuhnya atau diterapkan terlalu singkat, biasanya kurang dari 6-24 jam, meninggalkan tisu tidak mengeras secara memadai. Dehidrasi cepat melalui solusi etanol, seperti melompat dari 70% hingga 100% terlalu cepat, mengekstrak pengeluaran air secara berlebihan, menghentikan tisu. Panas yang berlebihan selama penyusut lilin, sering di atas 60 °C, lebih terhadap pengeras atau mengecilkan sampel halus, mengurangi kualitas.
Optimalkan fiksasi: menggunakan solusi formalin buffered fosfat untuk menstabilkan jaringan dengan protein sambungan silang, memelihara struktur tiga-dimensinya. Memungkinkan 6 hingga 24 jam untuk fiksasi, tergantung pada ukuran sampel, dan memperpanjang ini untuk tisu yang lebih besar atau lebih padat, menggunakan agitasi lembut bahkan untuk meminimalkan distorsi.
Kontrol dehidrasi: Ikuti seri etanol bertahap-70%, 90%, dan 100%, dengan langkah 15 hingga 45 menit-untuk melepaskan air secara perlahan, menghindari masalah melengkung. Pantau setiap tahap untuk mencegah sisa air, yang dapat membuat tisu rapuh atau lembut.
Mengelola suhu: menjaga pantulan lilin pada 60 °C atau di bawah, dan secara berkala memeriksa embedding center hot plate dan wax reservoir untuk menghindari terlalu panas, memastikan bagian yang andal dan berkualitas tinggi untuk analisis.
Udara yang dipertahankan dalam sampel tisu menciptakan Void, mengganggu kerutan, dan menyebabkan bagian yang tidak merata, terutama dalam tisu berpori atau padat seperti paru atau tulang. Masalah ini sering dimulai selama fiksasi, di mana sampel tidak sepenuhnya direndam dalam lem tetap, memblokir penetrasi reagen dan mengetuk gelembung udara. Siklus vakum tidak memadai dalam prosesor jaringan otomatis, terutama model transfer cairan, gagal menghapus udara, mengorbankan kualitas. Tisu padat atau berpori terutama rentan, karena kantong udara bertahan, menghambat seragam pemrosesan dan analisis hilir.
Pengaturan fiksasi halus: gabungkan tisu sepenuhnya dalam perbaikan seperti formalin segera setelah pengumpulan untuk memastikan cakupan lengkap. Untuk sampel berpori seperti paru-paru, gunakan ruang vakum atau agitasi lembut selama fiksasi untuk memamerkan udara yang terjebak, mencegah kantong persisten.
Gunakan prosesor Modern: memanfaatkan prosesor tisu transfer cairan, seperti Leica Peloris™Dan HealthSkyMesin prosesor tisu, Dengan siklus vakum dan tekanan untuk menghilangkan udara, terutama dari tisu padat. Program waktu vakum yang cukup disesuaikan dengan jenis sampel untuk hasil optimal.
Memangkas dan memelihara: memangkas sampel hingga ketebalan 4mm atau kurang selama pembedahan untuk memfasilitasi akses fixative dan reagen, mengurangi retensi udara. Menjaga peralatan dan melatih staf untuk menemukan masalah terkait udara, seperti noda tidak merata, untuk bagian yang halus dan berkualitas tinggi.
Embedding buruk atau hasil perangkap lembut, lembap, atau blok tidak rata, membuat micromom memberikan tantangan dan menghambat analisis rinci. Masalah ini terjadi ketika dehidrasi tidak ditemukan, meninggalkan sisa air yang memblokir penetrasi lilin, atau ketika membersihkan agen seperti xylene gagal mengalihkan etanol sepenuhnya, mengorbankan perangkap. ImpropeOrientasi r selama tisu misperata embedding, struktur kunci samar, sementara kualitas rendah atau impure parafin tidak memiliki konsistensi yang diperlukan untuk blok tangguh, dapat dipisah, dan memengaruhi kualitas.
Pastikan dehidrasi menyeluruh: Gunakan seri etanol bertahap-70%, 90%, dan 100%, dengan langkah 15 hingga 45 menit-untuk menghilangkan semua air gratis, memeriksa sisa kelembaban sebelum membersihkan untuk mencegah tisu lembut dan memastikan kesiapan.
Fokus pada kliring: Menjalankan tisu melalui perubahan xylene-20, 20, dan 45 menit-untuk mengantarkan etanol sepenuhnya, atau gunakan protokol bebas xylene dengan isopropanol, menyesuaikan suhu lilin sedikit di atas 60 °C untuk penghapusan agen lengkap.
Orient dan menggunakan lilin berkualitas: tisu Orient dengan hati-hati dalam cetakan, menuliskan deskripsi spesimen untuk melaksanakan penelitian atau tujuan diagnostik, karena pesawat bagian ini sangat penting. Berinvestasi dalam lilin parafin premium dengan aditif seperti styrene untuk kekerasan dan elastisitas, memungkinkan bagian tipis 2 µm dan pita.
Pemeriksaan dan kereta: Periksa pusat embedding secara berkala untuk kualitas lilin yang konsisten dan kontrol suhu. Melatih staf untuk menangani tisu secara perlahan dan akurat, memproduksi blok yang stabil, bagian untuk Noda dan mikroskop.
Sangat penting mencegah kesalahan dalam pemrosesan tisu, terutama dalam Diagnostik, di mana sampel yang dirusak dapat menyebabkan tidak ada diagnosis dan kesulitan pasien. Kesalahan sering terjadi karena penjadwalan yang buruk, fiksasi tidak memadai, atau reagen yang diabaikan. Untuk menghindari ini, sesuai dengan jadwal pemrosesan pada jenis jaringan dan ukurannya-menghindari penggunaan yang pendek untuk sampel besar dan lemak seperti tisu payudara atau yang panjang untuk biologi kecil. Perbaiki spesimen dalam formalin segera setelah pengumpulan, tambahkan waktu ekstra dalam prosesor jika diperlukan. Mengganti etanol, xylene, dan lilin per pedoman ketat, menggunakan alat sepertiLeica Biosystems PELORISUntuk kontrol kualitas. Menangani tisu lembut selama embedding untuk menghindari fraktur, menggunakan forceps panas cukup hangat untuk mencair lilin. Melatih staf secara menyeluruh mengenai teknik dari desinfektan ke embedding untuk mengurangi kesalahan manusia. Langkah-langkah ini melindungi spesimen, memastikan hasil andal untuk penelitian dan diagnostik.
Pengolahan tisu berkualitas tinggi menuntut Prosedur suara, bahan berkualitas, dan perawatan yang teliti. Menyesuaikan jadwal untuk ukuran dan jenis tisu, seperti penggunaan 6 jam untuk sampel 4mm, menyesuaikan untuk tisu yang lebih besar atau lebih padat. Berinvestasi dalam prosesor modern dengan siklus vakum/tekanan dan sirkulasi cairan untuk hasil seragam dan cepat. Segarkan etanol, agen pembersih, dan lilin secara berkala, memanfaatkan peringatan otomatis untuk konsistensi. Gunakan opsi bebas xylene yang lebih aman seperti isopropanol untuk menjaga kualitas. Periksa embedding center hot plate dan wax reservoir untuk mencegah kerusakan panas. Orient tisu tepat dalam cetakan untuk bagian yang benar. Pilih parafin premium dengan aditif untuk kekerasan dan elastisitas, memungkinkan bagian tipis seperti pita. Pemrosesan dokumen berjalan, perubahan reagen, dan pemeriksaan peralatan untuk pemecahan masalah. Praktik ini memberikan spesimen yang tertanam parafin berkualitas tinggi, konsisten untuk mempartisi, Noda, dan analisis.
HealthSky'sPerlengkapan Cytology berbasis cairDirancang untuk meningkatkan akurasi diagnostik dengan memberikan sampel seluler yang bersih dan diawetkan dengan baik. Sistem pemrosesan tingkat lanjut memastikan distribusi sel pada slide, mendukung evaluasi yang lebih tepat dan mengurangi peluang kegagalan yang terlewatkan. Ideal untuk lab klinis, memberikan konsistensi dan kejernihan untuk pemeriksaan sisttologis rutin.
EN
jp 
ko 
fr 
de 
pt 
ar 
es 
ru 
fa 
id 
